中国预防兽医学报 /oa H7N9流感病毒人源分离株与禽源分离株复制特性研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20180501 为了解H7N9流感病毒的生物学特性,本研究对H7N9流感病毒人源分离株(AH1)和禽源分离株(CK53)复制特性进行了系统比较研究。序列分析显示,AH1和CK53病毒在进化关系上同源性较高,仅有8个氨基酸位点差异。两株病毒分别接种禽类细胞DF1和CEF,人类细胞A549和Calu-3,检测其复制能力,结果显示在33℃和37℃两种温度条件下,两种病毒在禽类细胞中复制能力相似,但在人类细胞中AH1复制能力强于CK53。CK53在哺乳动物细胞连续培养5代后出现包含PB2/E627K在内共5个氨基酸位点的突变,显示禽源分离株在哺乳动物细胞复制过程中可以迅速获得适应性突变。突变病毒CK53-P5在A549细胞中复制水平明显强于CK53,其复制能力与AH1差异不明显。本研究进一步揭示了H7N9流感病毒人源分离株与禽源分离株的生物学特性差异,为深入了解其致病分子机制提供了实验依据。<br />  关键词:H7N9;流感病毒;复制;细胞 2018年05月15 00:00 2018年05 371 374 0 &nbsp; <p>郭 晶<sup>1</sup>,李媛媛<sup>2</sup>,裴兰英<sup>1</sup>,邓国华<sup>2</sup>,施建忠<sup>2</sup>,陈化兰<sup>2*</sup>,李旭勇<sup>1*<br /></sup></p> 猪脑心肌炎病毒3AB蛋白与宿主蛋白RPL11相互作用的鉴定 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20180502 为了研究与猪脑心肌炎病毒(EMCV) 3AB相互作用的宿主蛋白,本实验采用酵母双杂交方法筛选BHK-21细胞cDNA酵母表达文库,获得 6个与EMCV 3AB相互作用的宿主蛋白(RFC5、LRWD1、PIH1D1、RPL11、RPS20和LGALS1),经分析显示这些蛋白分别参与DNA复制、有丝分裂和细胞凋亡等过程;酵母共转化试验与免疫共沉淀试验证实EMCV 3AB和RPL11两者之间存在特异性结合;激光共聚焦试验显示EMCV 3AB与RPL11共同过度表达时,二者共定位在细胞核中,而在EMCV感染状态下,3AB与RPL11主要共定位在细胞质中。另外,EMCV感染HeLa细胞能降低细胞中p53的蛋白水平,但3AB并不直接促进p53蛋白降解,表明EMCV 3AB对RPL11-MDM2-p53通路无影响。本研究发现并证实了RPL11与EMCV 3AB之间的相互作用,为进一步研究RPL11蛋白在EMCV复制中的作用奠定了基础。<br />  2018年05月15 00:00 2018年05 375 380 0 &nbsp; <p>薛 娟<sup>1,2</sup>,张昆丽<sup>2</sup>,张元峰<sup>1,2</sup>,黄 丽<sup>2</sup>,杨玉莹<sup>1*</sup>,翁长江<sup>2*<br /></sup></p> 禽致病性大肠杆菌CE129 VI型分泌系统主要亚单位基因hcp1、hcp2缺失株的构建与验证 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20180503 为获得禽致病性大肠杆菌(APEC) CE129 VI型的hcp1、hcp2基因缺失株,本研究利用Red同源重组系统对APEC野生株CE129的VI型分泌系统(T6SS) hcp1和hcp2基因进行敲除,获得hcp1、hcp2基因单缺失株CE129△hcp1、CE129△hcp2和双缺失株CE129△hcp1△hcp2。将hcp1、hcp2基因分别克隆到表达载体pBR322和pACYC184中,构建相应的基因回补株CE129△hcp1/phcp1、CE129△hcp2/phcp2和CE129△hcp1△hcp22/phcp1 phcp2。通过PCR特异性检测和基因测序显示,上述突变株与回补株均成功构建,且均能够稳定遗传。上述基因缺失株和回补株的成功构建,有助于深入了解APEC CE129菌株T6SS的作用机制,为进一步研究APEC的致病机理及其防控奠定了基础。<br />   2018年05月15 00:00 2018年05 381 385 0 &nbsp; <p>丁雪燕<sup>1,2†</sup>,张 琪<sup>1,2†</sup>,田 延<sup>1,2</sup>,王 亨<sup>1,2</sup>,张 伟<sup>1,2,3</sup>,石宝兰<sup>1,2,3</sup>,张建军<sup>1,2,3</sup>,<br />朱国强<sup>1,2*<br /></sup></p> 猪、鸡与貂源肠外致病性大肠杆菌群型、耐药性与致病性分析 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20180504 为检测不同动物源肠外致病性大肠杆菌(ExPEC)的耐药及致病性差异,本研究从132份鸡、猪和水貂等动物肠道外组织中分离鉴定大肠杆菌,并对分离菌株进行了16S rRNA基因测序、毒力基因检测、药敏试验、O抗原鉴定、系统进化群分析及动物致病性试验。实验结果显示:分离出53株ExPEC,且至少携带特异性毒力基因pap、sfa/foc、afa/dra、iutA、kpsMT II中的两种基因,并携带fimH、ibeA、hlyA、malX、iss、iroN等其它相关毒力基因。53株ExPEC分离株对氯霉素、卡那霉素、头孢噻吩、四环素、多粘菌素B、氨苄青霉素等呈现不同程度的多重耐药性;O抗原主要分布于O1、O2、O8、O11、O38、O78、O120血清型;系统进化群分析结果显示:28株属于A群,19株属于B1群,1株为B2群,5株属于D群。选取20株ExPEC分离菌株按照6×106 cfu/只对小鼠进行腹腔注射,验证其致病性;并测定ExPEC6、ExPEC42、ExPEC52、ExPEC53菌株对BALB/c小鼠的LD50,其结果分别为3.49×106 cfu/mL、9.49×105 cfu/mL、9.48×106 cfu/mL、2.38×107 cfu/mL。本研究为动物源性ExPEC的预防诊断提供依据,并为下一步研究其致病机理等奠定基础。<br /> 2018年05月15 00:00 2018年05 386 391 0 &nbsp; <p>许腾林<sup>1,2</sup>,邢桂玲<sup>2,3</sup>,姜成刚<sup>2</sup>,刘家森<sup>2</sup>,刘大飞<sup>2</sup>,姜 骞<sup>2</sup>,<br />李志杰<sup>2</sup>,康洪涛<sup>2</sup>,郭东春<sup>2*</sup>,曲连东<sup>2* <br /></sup></p> 基于测序技术的贵州主要品种羊TLR2基因多态性分析 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20180505 为了解贵州省不同品种羊TLR2基因序列的多态性特征,本研究以不同品种羊血液DNA为模板,对TLR2基因完整ORF进行PCR扩增、测序及序列分析。结果显示,5种羊TLR2基因扩增长度均为2 355 bp。对贵州黑山羊、黔北麻羊、贵州白山羊、波尔山羊和湖羊5种羊TLR2基因进行种内比对结果显示,贵州黑山羊、黔北麻羊、波尔山羊种内TLR2基因序列保守,贵州白山羊种内A1732T位点存在多态性,湖羊种内在G1133A、T1162G、A1949G等位点存在基因多态性;种间比对结果显示,4种山羊有16个核苷酸位点存在多态性,其中有10个错义突变。4种山羊与湖羊进行比对结果显示,湖羊存在较多的多态性位点,其中有11处位点的差异导致氨基酸的变化。蛋白质结构预测分析显示,不同品种羊TLR2基因呈现的错义突变位点引起了其蛋白质二级结构和三级结构的变化,提示可能存在TLR2参与免疫相关信号通路水平的变化。本研究填补了贵州地方山羊品种TLR2基因多态性空白,为探究TLR多态性与羊疫病易感性关系提供基础研究资料。<br />   2018年05月15 00:00 2018年05 392 396 0 &nbsp; <p>唐 沙<sup>1,2</sup> ,杨 源<sup>1,2</sup>,王 军<sup>1,2</sup>,文 明<sup>1,2</sup>,周碧君<sup>1,2</sup>,程振涛<sup>1,2*</sup>,岳 筠<sup>3<br /></sup></p> 伪狂犬病病毒Guizhou-T1株的分离鉴定及其遗传变异研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20180506 为了解贵州猪伪狂犬病病毒(PRV)流行株的病原形态特征、致病性及遗传变异情况,本实验对收集自贵州规模化猪场伪狂犬病净化过程中PCR检测的阳性病料样品,采用细胞接毒分离培养、病毒的形态结构观察和易感动物接种试验对其病原进行鉴定。结果显示,本研究分离到一株PRV,命名为PRV Guizhou-T1株;并对其进行病毒效价的测定及gE基因核苷酸和氨基酸序列差异性分析。结果显示:PRV Guizhou-T1株gE基因序列与GZ-Z1株和Guizhou-DY株同源性分别为97.5 %和99.3 %,其TCID50为10-10.11/100 μL;PRV Guizhou-T1株在gE基因编码的氨基酸序列第48和第496位均有天冬氨酸(Asp D)的插入,与PRV变异株变异位点一致,且在其第48位缺失酪氨酸(Tyr Y)。表明本研究分离得到了一株PRV变异株。本研究可为贵州PRV病原学的研究提供参考。<br />   2018年05月15 00:00 2018年05 397 400 0 &nbsp; <p>胡玲玲,汤德元<sup>*</sup>,曾智勇,王 彬,黄 涛,龙冬梅,石远菊,杨 伟,叶 丽<br /></p> 河北地区鸡源致病性大肠杆菌毒力基因检测与耐药性分析 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20180507 为分析河北地区鸡源致病性大肠杆菌(E.coli)毒力基因的携带情况及其与耐药性的相关性,本研究采用PCR方法和K-B纸片法,测定了2013年~2016年从河北省蛋鸡场分离的104株致病性E.coli的19种毒力基因及其耐药性情况。结果显示,从104株致病性E.coli中检出16种不同的毒力基因,总检出率为84.2 %(16/19),其中毒力基因irp2、fyuA、ompT、iucDa、colv、tsh的检出率均在90 %以上,毒力基因iroN、fimC、papC、hlyF、ECs370、ECs3737的检出率在62.5 %~88.5 %,iucA、astA、vat和iss毒力基因的检出率均低于60 %,Ler、eaeA和sfa毒力基因未检出;E.coli分离菌株对20种抗菌药物呈现出多重耐药性,其中耐11~14种抗生素最多,占总分离菌的50.96 % (53/104),对四环素、阿莫西林、氨苄西林、复方新诺明有较高的耐药率,分别为99.04 %、96.15 %、92.31 %、91.35 %;采用SPSS18.0软件统计学方法分析显示,分离的104株鸡致病性E.coli携带的毒力基因和耐药性两者之间不存在明显的相关性。本研究为河北地区鸡致病性E.coli的防控提供科学依据。<br />  2018年05月15 00:00 2018年05 401 405 0 &nbsp; <p>贾青辉<sup>†</sup>,张召兴<sup>†</sup>,李蕴玉,李佩国<sup>*</sup>,张香斋<sup>*</sup>,张艳英<br /></p> 塞尼卡谷病毒重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条检测方法的建立 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20180508 为建立塞尼卡谷病毒(SVV)重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条(RPA-LFD)检测方法,本研究针对SVV 3D基因设计了引物和探针,通过反应条件优化、特异性、灵敏性和重复性试验,建立了SVV RPA-LFD检测方法。特异性试验结果显示,该方法与口蹄疫病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸道综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、圆环病毒、伪狂犬病毒无交叉反应;在40 ℃、20 min内可检测的最低浓度为56拷贝/μL质粒标准品;通过3次重复试验检测,LFD检测线灰度值变异系数范围在4.49 %~9.73 %。利用该方法对120份国内临床样品进行检测,结果均为阴性。本研究首次建立了检测SVV的等温、快速RPA-LFD方法,读取结果不依赖任何仪器设备,为猪群感染SVV的现场快速诊断、流行病学研究和根除方案的制定提供帮助。<br />   2018年05月15 00:00 2018年05 406 410 0 &nbsp; <p>樊晓旭<sup>1†</sup>,宋翥远<sup>2†</sup>,赵永刚<sup>1</sup>,赵 明<sup>3</sup>,董雅琴<sup>4</sup>,张永强<sup>1</sup>,李园丽<sup>1,5</sup>,迟田<sup>1</sup>,<br />刘春菊<sup>1</sup>,戈胜强<sup>1</sup>,张志诚<sup>1</sup>,吴晓东<sup>1</sup>,王树双<sup>1</sup>,王志亮<sup>1*</sup> <br /></p> 牛副流感3型病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛病毒性腹泻病毒和牛支原体多重PCR检测方法的建立 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20180509 为建立检测牛副流感3型病毒(BPIV3)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和牛支原体(M.bovis)的多重PCR检测方法,本研究根据GenBank中登录的BPIV3的HN基因、IBRV的gC基因、BVDV的5’UTR和M.bovis的oppD/F基因序列设计特异性引物,通过优化反应条件建立了一种可以同时检测以上4种病原的多重PCR方法。结果显示,该方法对牛呼吸道合胞体病毒、小反刍兽疫病毒、牛布鲁氏菌、羊布鲁氏菌、牛源多杀巴氏杆菌A型和B型无特异性扩增,对BPIV3和BVDV的cDNA最低检测量分别为100 pg和1 ng ,对IBRV和M.bovis的DNA最低检测量分别为10 pg和100 pg,具有较高的特异性和灵敏性。对临床33份鼻拭子样品和12份牛肺样品的检测结果与已发表文献中PCR方法的检测结果一致。本研究建立的多重PCR检测方法可同时对BPIV3、IBRV、BVDV和M.bovis进行检测,为这4种病原的诊断和检测提供了一种实用、便捷的方法。<br />  2018年05月15 00:00 2018年05 411 415 0 &nbsp; <p>杨 帆<sup>1,2</sup>,徐 娜<sup>1,2</sup>,雷 宇<sup>1,2</sup>,郝瑞峰<sup>3</sup>,李平安<sup>1,2</sup>,关平原<sup>1,2*<br /></sup></p> 羊呼吸道主要支原体和细菌病原的多重PCR检测方法的建立及应用 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20180510 &nbsp;摘 要:为建立一种能够同时检测绵羊肺炎支原体、丝状支原体簇成员、多杀性巴氏杆菌和溶血性曼氏杆菌4种羊呼吸道主要病原的多重PCR方法,本研究采用各病原的特异性引物,经优化反应条件,建立了一种可以同时检测以上4种病原的多重PCR方法,并对128份临床样品进行了检测。结果显示,该方法对其它细菌和支原体扩增结果均为阴性,特异性强;该方法对以上4种病原基因组DNA的检测下限分别为2.2×103拷贝、2.1×103拷贝、1.1×103拷贝和8.3×102拷贝。该方法特异性强、敏感性高,为上述4种病原的快速检测和鉴定,以及临床羊呼吸道疾病的诊断提供了一种方便、快捷和准确的工具。<br />  2018年05月15 00:00 2018年05 416 420 0 &nbsp; <p>胡玉婷,刀筱芳,王成龙,丁可莉,宋明彤,杨发龙<sup>*</sup></p> 分子修饰狂犬病ERA疫苗株剂量依赖反应及对强毒的攻毒保护研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20180512 为评价分子修饰狂犬病ERA疫苗株(简称rERAG333E)的免疫效果,本实验将其分别以103 FFU/mL、104 FFU/mL、105 FFU/mL、106 FFU/mL的剂量口服免疫小鼠,监测小鼠血清中和抗体持续期;同时在小鼠免疫4周后采用不同现地流行株进行攻毒保护实验。结果表明,rERAG333E以104 FFU/mL以上剂量免疫小鼠,免疫后各实验组小鼠均能够产生较高水平的抗狂犬病病毒(RABV)中和抗体,且能够抵抗经典效检强毒株CVS-24和现地流行强毒株GX/09和MRV的致死性攻击,保护率达到100 %;免疫有效持续期能够达到24周以上。以上结果表明rERAG333E是一种安全有效,具有推广使用潜力的狂犬病口服疫苗候选株。<br /> 2018年05月15 00:00 2018年05 421 425 0 &nbsp; <p>王雪莲,李翠霞,帅 磊,王喜军,葛金英<sup>*</sup>,步志高<sup>*<br /></sup></p> 重组SPLUNC1蛋白对感染绵羊肺炎支原体的盘羊杂交羊的免疫调节作用研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20180511 为研究重组SPLUNC1蛋白对感染绵羊肺炎支原体(MO)后的盘羊杂交羊免疫调节作用,本研究将6只巴什拜羊分为A组,18只盘羊杂交羊随机分为B、C、D组,对实验羊人工感染MO后第5 d,C组气管注射巴什拜羊重组SPLUNC1蛋白、D组气管注射盘羊杂交羊重组SPLUNC1蛋白,每天150 μg/只;A、B组每天气管注射等量的生理盐水作为对照组。采用ELISA方法检测各组羊血清中MO 抗体水平以及IL-8、IL-12、IL-13表达水平。结果显示,感染前所有实验羊MO抗体均为阴性,感染后第14 d所有实验羊MO抗体均为阳性;IL-8水平在感染后第14 d~21 d,A、C、D组极显著和显著地低于B组(p&lt;0.01;p&lt;0.05;p&lt;0.01)。 IL-12水平在感染后第14 d,A、C和D组极显著和显著地低于B组(p&lt;0.01;p&lt;0.05;p&lt;0.01),第21 d时,A、C和D组极显著低于B组(p&lt;0.01)。IL-13水平在感染后第5 d,A组显著低于B、C和D组(p&lt;0.05),在第7 d~21 d,A、C、D组显著和极显著低于B组(p&lt;0.05;p&lt;0.01;p&lt;0.01)。实验数据表明重组SPLUNC1蛋白对盘羊杂交羊具有明显的免疫调节作用。本研究为绵羊支原体肺炎的治疗提供了实验依据。<br />   2018年05月15 00:00 2018年05 426 430 0 &nbsp; <p>刘海燕,王继雪,赵 宁,杨 义,袁 婷,孙延鸣<sup>*<br /></sup></p> 番鸭呼肠孤病毒感染对雏番鸭肠黏膜组织结构及肠道免疫细胞的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20180513 为探究番鸭呼肠孤病毒(MDRV)感染对雏番鸭肠黏膜免疫的影响,本研究将100只1日龄MDRV抗原抗体阴性雏番鸭随机分为二组:空白对照组(NCG)和MDRV同居感染组(CIG),利用人工感染发病的20只番鸭对GIC组番鸭进行同居感染。NCG和CIG组番鸭分别于后者同居感染1 d、3 d、6 d、10 d、15 d、21 d后采集其十二指肠、空肠、回肠样品进行肠道形态结构(绒毛高度、宽度、V/C值、肠壁厚度、绒毛表面积)的观察及免疫相关细胞(上皮内淋巴细胞、杯状细胞、肥大细胞)的检测。结果显示:与NCG相比,CIG番鸭肠道绒毛高度下降、宽度变窄,排列稀疏,V/C值降低,绒毛表面积下降,肠壁厚度变薄,上皮内淋巴细胞、杯状细胞、肥大细胞数量下降,尤其是同居感染6 d以后其各项检查指标均与NCG差异极显著(p&lt;0.01)。表明MDRV可导致肠道消化吸收功能障碍和黏膜免疫抑制。该研究结果进一步充实MDRV感染的致病机制。<br />   2018年05月15 00:00 2018年05 431 437 0 吴异健<sup>1,2</sup>,姜慧慧<sup>1</sup>,黄丽娜<sup>1</sup>,朱二鹏<sup>1,2</sup>,周五朵<sup>1,2</sup>,王全溪<sup>1,2</sup>,吴晓平<sup>1,2</sup>,<br />李&nbsp; 健<sup>1,2</sup>,吴宝成<sup>1,2</sup>, 黄一帆<sup>1,2*<br /></sup> 抗沙门菌PEG菌毛单克隆抗体的制备及初步临床应用 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20180514 为制备抗沙门菌PEG菌毛单克隆抗体(MAb),本研究从鸡白痢沙门菌(CVCC526)基因组中扩增菌毛蛋白基因pegA,将其克隆至原核表达载体pET-22b(+)中构建重组质粒pET-pegA,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达并纯化重组蛋白rPegA。应用该蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经间接ELISA筛选后获得1株稳定分泌MAb的杂交瘤细胞株,命名为3D12,抗体亚类鉴定其属于IgG1亚类,腹水效价为1∶64 000。通过western blot和玻板凝集试验检测结果显示,该MAb与肠炎沙门菌、鸡白痢沙门菌和鸡伤寒沙门菌呈阳性反应,而与鼠伤寒沙门菌、大肠杆菌CE2、CE7、CE53、DH5α 均不发生反应。以PEG菌毛MAb建立玻板凝集方法,检测本实验室临床分离保存的72份禽源沙门菌,同时以商品化沙门菌诊断血清作为平行对照,结果两种方法符合率达97.2 %。本研究研制的MAb可用于沙门菌PEG菌毛基础研究和快速检测。<br /> 2018年05月15 00:00 2018年05 438 442 0 &nbsp; <p>杨 溢<sup>1,2?</sup>,杨玮枫<sup>3?</sup>,张 东<sup>1,2</sup>,孟 霞<sup>1,2</sup>,潘夏雨<sup>4</sup>,袁天梅<sup>4</sup>,朱春红<sup>5*</sup>,朱国强<sup>1,2*<br /></sup></p> 猪骨髓源树突状细胞体外诱导培养与鉴定 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20180515 树突状细胞(DC)是机体主要的抗原递呈细胞,在固有免疫及适应性免疫中发挥重要作用。为进一步探究DC功能及诱导其分化的方法,本研究采用硬膜外腔麻醉法麻醉受试猪,以骨髓采集针从髋骨处抽取骨髓,裂解红细胞后,差速贴壁法获得前体细胞后,添加重组猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和重组猪白细胞介素4诱导其分化,以形态学方法和流式细胞术鉴定其特征。结果显示,骨髓前体细胞经诱导分化后具有典型的DC形态,其标记分子分化抗原簇1在第6 d和8 d阳性率分别达65.13 % (p&lt;0.01)和56.5 % (p&lt;0.01),标记分子二型猪白细胞抗原(SLA-IL-DR)在诱导后第6 d和8 d阳性率分别为86.87 % (p&lt;0.01)和84.60 % (p&lt;0.01)。本研究建立了活体猪骨髓源DC的体外分离培养和诱导分化方法,为基于DC的疾病防控研究提供依据。<br /> 2018年05月15 00:00 2018年05 443 446 0 &nbsp; <p>巩栋梁<sup>1,2,3</sup>,雍艳红<sup>1</sup>,韦美兰<sup>2</sup>,石 琳<sup>2</sup>,李俊玉<sup>2</sup>,陈进军<sup>1*</sup>,巨向红<sup>1,3*<br /></sup></p> 山东省2012年~2016年猪流行性腹泻病毒分子流行病学调查及对其ORF3基因分析 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20180516 为了解山东省猪流行性腹泻病毒(PEDV)流行情况,本研究采用RT-PCR的方法对2012年1月~2016年12月山东省13个地市采集的258份疑似PEDV感染样品进行检测,并设计引物扩增PEDV ORF3基因片段,通过生物信息学软件对26个具有代表性的完整的PEDV ORF3基因序列进行遗传进化分析。结果显示PEDV平均每年检出率达72.1 %,表明PEDV是当前山东地区仔猪腹泻的主要致病病原。遗传进化分析显示,26株PEDV ORF3基因序列属于G2基因型,与其它参考PEDV病毒株同源性较高(93.8 %~100 %),相对保守。其中3株PEDV流行株位于2a亚型中,这在华北地区属首次报道。PEDV 2a亚型基因序列具有特异位点突变,可作为鉴别2a亚型与其它亚型的分子标记。本研究揭示了山东省PEDV流行株ORF3基因的主要基因型,为该省PEDV的防控提供依据。<br />  2018年05月15 00:00 2018年05 447 450 0 &nbsp; <p>张 月<sup>†</sup>,李玉杰<sup>†</sup>,马慧玲,王贵升,蔺晓月,孙圣福,孔祥华,王苗利,陈 静<sup>*</sup>,<br />田夫林<sup>*<br /></sup></p> 联合使用药物对澳洲龙纹斑鱼种感染小瓜虫的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20180517 淡水鱼类小瓜虫病(白点病)是由多子小瓜虫(I.multiifliis)引发的一种重要原虫病,其对澳洲龙纹斑(M.peelii peelii)苗种阶段鱼体有强致病力,可导致澳洲龙纹斑苗种全部死亡。为合理用药防控澳洲龙纹斑苗种培育阶段小瓜虫感染,本实验选取平均体重为14.94±3.28 g,平均体长为11.57±2.20 cm的澳洲龙纹斑鱼种,自然感染小瓜虫后,采取具有抗小瓜虫、抗继发感染和促进上皮组织收敛愈合的3种药物联合使用,以小瓜虫感染率、感染强度和鱼种死亡率等指标,观察和评估联合使用药物对澳洲龙纹斑鱼种小瓜虫病防控效果。结果显示,药物实验组澳洲龙纹斑鱼种60 d内发生零星死亡,总死亡率为5.6 %;对照组感染小瓜虫后陆续死亡,感染后第11 d感染率上升为100 %,死亡率达50 %,第16 d时澳洲龙纹斑鱼种全部死亡。实验组澳洲龙纹斑鱼种鳃部、背鳍和体表皮肤小瓜虫感染率和感染强度均显著低于对照组(p&lt;0.01)。表明参照本研究联合使用药物可有效控制澳洲龙纹斑苗种感染小瓜虫,使澳洲龙纹斑苗种小瓜虫病得到有效的控制。本研究结果对澳洲龙纹斑苗种小瓜虫病防控具有借鉴意义。<br />   2018年05月15 00:00 2018年05 451 454 0 &nbsp; <p>罗土炎<sup>1</sup>,罗 钦<sup>1</sup>,饶秋华<sup>1</sup>,林 旋<sup>2</sup>,刘 洋<sup>1</sup>,任丽花<sup>1</sup>,涂杰峰1,王寿昆<sup>2</sup>,张志灯<sup>3*<br /></sup></p> 抗猪SIgA SC片段单克隆抗体的制备及鉴定 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20180518 为获得抗猪分泌型IgA (SIgA)的单克隆抗体(MAb),本研究以纯化的SIgA蛋白为抗原,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,通过间接ELISA方法筛选出1株稳定分泌抗SIgA SC片段的杂交瘤细胞株,命名为2F9。MAb亚类鉴定结果显示其亚类为IgG1/κ链。杂交瘤细胞培养上清液和腹水的效价分别为1∶200和1∶16 000。Western blot鉴定显示该MAb能够识别天然SIgA蛋白;IFA显示该MAb可以识别真核细胞表达的SIgA SC蛋白。抗猪SIgA SC片段的MAb制备,为建立一系列猪消化道病原的特异性SIgA诊断方法及研究黏膜免疫提供了重要工具,具有广阔的应用前景。<br />   2018年05月15 00:00 2018年05 455 458 0 &nbsp; <p>高 冉<sup>1,2</sup>,刘建波<sup>2</sup>,陈建飞<sup>2</sup>,时洪艳<sup>2</sup>,张 鑫<sup>2</sup>,石 达<sup>2</sup>,曹丽艳<sup>2</sup>,董素凤<sup>3</sup>,冯 力<sup>2*<br /></sup></p> 寨卡病毒疫苗的研究进展 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20180519 2018年05月15 00:00 2018年05 459 462 0 &nbsp; <p>黄子恩<sup>1</sup>,张 炜<sup>2</sup>,耿 耘<sup>1</sup>,雷 涵<sup>2*<br /></sup></p> 金黄色葡萄球菌锰转运蛋白C的研究进展 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20180520 2018年05月15 00:00 2018年05 463 466 0 &nbsp; <p>余 崴,马金柱,于立权,崔玉东<sup>*<br /></sup></p>