中国预防兽医学报 /oa 硒对金黄色葡萄球菌感染的奶牛乳腺上皮细胞Nod2/MAPK/mTORs信号通路中关键因子<br />mRNA转录水平的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20190901 为探究硒(Se)对金黄色葡萄球菌(S.aureus)感染的奶牛乳腺上皮细胞(bMECs) Nod2/MAPK/mTORs信号通路的调控机制,本研究首先用不同浓度硒(2 μmol/L、4 μmol/L和8 μmol/L)对bMECs进行预孵育,12 h后再经S.aureus感染处理。分别于感染后6 h、8 h和10 h收集bMECs提取其RNA,应用qPCR方法检测bMECs中Nod2、RIP2、JNK、AKT、mTOR、IL-8和IL-10 mRNA的转录水平。结果显示,S.aureus能显著提高bMECs中Nod2、RIP2、JNK、AKT和mTOR mRNA的转录水平(p&lt;0.01),而硒能不同程度的抑制这些因子mRNA的转录水平(p&lt;0.05或p&lt;0.01)。此外,S.aureus能显著或极显著提高bMECs中IL-8和 IL-10 mRNA的转录水平(p&lt;0.05或p&lt;0.01),而硒对S.aureus感染的bMECs中IL-8和IL-10 mRNA的转录水平有明显抑制作用(p&lt;0.05或p&lt;0.01)。上述结果表明,硒可通过抑制Nod2/MAPK/mTORs信号通路的转导而减轻S.aureus诱导的bMECs的炎症反应。本研究为阐明硒能减轻S.aureus诱导的bMECs炎症反应的机制提供试验依据。<br />   2019年10月25 00:00 2019年09 879 884 0 &nbsp; <p>关立增<sup>1</sup>,王 亨<sup>2,3</sup>,刘俊俊<sup>2,3</sup>,王 娟<sup>1</sup>,韩照清<sup>1</sup>,毕崇亮<sup>1*<br /></sup></p> 致蛋鸡卵黄性腹膜炎大肠杆菌分子分群、耐药表型及耐药基因型检测与分析 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20190902 为分析邢台和秦皇岛地区致蛋鸡卵黄性腹膜炎大肠杆菌(E.coli)分离株的分子分群情况及耐药表型和耐药基因型之间的相关性,本研究采用PCR法和96孔板微量肉汤稀释法分别对临床分离的42株致鸡卵黄性腹膜炎E.coli的系统进化分群、耐药基因和12种抗菌药物耐药表型进行检测。结果显示,42株分离菌株中属于A、B1、B2、D群的分别有7株、9株、14株、12株,以B2+D群流行为主;42株分离菌株对12种抗菌药物耐药性严重且呈现多重耐药性,其中对阿莫西林-克拉维酸、磺胺间甲氧嘧啶、多西环素等9种药物耐药率在45.24 %以上,对其它药物耐药率在19.04 %~38.10 %,耐12种、9种抗菌药物分离菌株最多,分别占分离菌株的19.05 %、16.67 %;42株分离菌株中耐药基因tetA、Sul1、TEM、Sul2、mcr-1、floR、SHV、tetR检出率在59.52 %以上,其它耐药基因检出率为14.29 %~38.10 %;ESBLs类、四环素类、喹诺酮类、头孢菌素类、磺胺类、多肽类和酰胺醇类7类抗菌药物的耐药表型和耐药基因型符合率在52.6 %以上,其中酰胺醇类、多肽类的耐药表型与耐药基因型符合率为100 %。本实验为致蛋鸡卵黄性腹膜炎E.coli防控及临床用药提供参考。<br />   2019年10月25 00:00 2019年09 885 890 0 &nbsp; <p>张召兴<sup>1,2</sup>,李佩国<sup>1*</sup>,李蕴玉<sup>1</sup>,贾青辉<sup>1</sup>,张香斋<sup>1</sup>,吴同垒<sup>1</sup>,张志强<sup>1<br /></sup></p> 鱼源鲁氏耶尔森菌mobBC基因无痕缺失株的构建及其毒性研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20190903 为探究鲁氏耶尔森菌(Yersinia ruckeri)的四型分泌系统(T4SS)中mobBC基因的作用,本研究构建了强毒力Y.ruckeri SC09菌株mobBC基因的无痕缺失株并研究了其生理变化和毒性影响。将mobBC基因上、下游同源臂克隆入自杀载体pLP12并转化供体菌β2163,得到pLP12-mobBC/β2163,进一步通过接合转移,将pLP12-mobBC导入受体菌株SC09中。利用抗性筛选和vmi480反向筛选获得无痕缺失株Y.ruckeri ΔmobBC,并进行PCR测序鉴定。同时构建回补株Y.ruckeriΔmobBC+pMobBC。通过电子显微镜观察缺失株形态变化,同时绘制野生型菌株、缺失株和回补株的生长曲线;将缺失株和野生型菌株感染模式小鼠,初步研究mobBC毒性;将野生型菌株、缺失株和回补株感染虹鳟鱼,进一步研究其对水生动物的体内毒性;对虹鳟鱼主要感染组织进行细菌计数并分析菌株在感染组织的分布差异;观察感染缺失株和野生型菌株的虹鳟鱼组织病理学和免疫组织化学差异,进一步分析毒性影响。结果显示,本实验构建了无痕缺失株Y.ruckeriΔmobBC,并回补了mobBC基因。缺失株与野生株超微结构对比变化不显著,但缺失株的生长性能弱于野生株和回补株,且表现出较弱的体内毒性和较轻的组织感染力。这提示mobBC基因可能是Y.ruckeri重要的毒力基因,该基因的缺失能够有效降低Y.ruckeri的增殖力和对宿主的感染力。本文首次研究了水产病原菌Y.ruckeri SC09的mobBC基因的毒性作用,为该病原菌的毒力研究增加了新的基础。<br /> 2019年10月25 00:00 2019年09 891 898 0 &nbsp; <p>刘 韬<sup>1?</sup>,魏文燕<sup>2?</sup>,刘家星<sup>2</sup>,汪开毓<sup>1*<br /></sup></p> 生鲜牛乳中金黄色葡萄球菌的鉴定及耐药分子特征研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20190904 为了解生鲜牛乳中金黄色葡萄球菌(S.aureus)的污染及耐药情况,研究其耐药的分子特征,本研究利用国标法分离了来自浙江杭州市某奶牛场99份生鲜乳中的S.aureus,通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)进行鉴定,对其进行质谱聚类分析和16S rDNA系统发育分析,采用微量肉汤稀释法测定其最小抑菌浓度(MIC),利用Illlumina HiSeq 4000平台对其进行全基因组测序,通过ResFinder数据库分析其耐药基因,利用EasyFig和BRIG软件进行耐药质粒比对分析。结果显示在99份生鲜牛乳中共分离到5株S.aureus (5.1 %),其质谱聚类和16S rDNA系统发育分析树形具有较高一致性。发现两株耐甲氧西林S.aureus (MRSA) SABHZ053和SABHZ079,且其多位点序列分型(MLST)同为ST965,其中菌株SABHZ079对青霉素、红霉素、克林霉素、头孢西丁、氧氟沙星、替米考星和庆大霉素7种抗生素耐药。全基因组测序分析后显示菌株SABHZ053和SABHZ079的染色体中均含有aph(3’)-III、ant(6)-Ia和mecA耐药基因。菌株SABHZ053存在2个耐药质粒,pSA053-1 (4 439 bp)介导tet(K)对四环素类耐药,pSA053-2 (34 609 bp)介导blaZ对青霉素耐药。菌株SABHZ079有3个耐药质粒,其中pSABHZ079-1 (39 227 bp)与pSA053-2同源,但相对插入了Tn551-erm(B)-aph(2’’)-Ia转座单元,可以介导其对大环内脂类和庆大霉素的耐药,质粒pSABHZ079-2 (2 473 bp)介导erm(C)对大环内脂类耐药,而质粒pSABHZ079-3 (4 439 bp)与pSA053-1完全相同。另外,本研究显示耐药质粒pSABHZ079-1可分为骨架I和II两部分,可能分别由来自人源的pNTUH_3874与pN315或其相似质粒杂合而来。本研究揭示了该奶牛场生鲜乳中S.aureus耐药性的分子特征,表明耐药质粒和转座元件是其耐药性产生的重要因子,为奶牛场合理用药和控制S.aureus的抗药性提供重要参考。<br />   2019年10月25 00:00 2019年09 899 905 0 &nbsp; <p>张 玲<sup>1,2</sup>,常 江<sup>1,2</sup>,吴俐勤<sup>2</sup>,裘罕琦<sup>3</sup>,周沁怡<sup>4</sup>,戴贤君<sup>3</sup>,杨 华<sup>2</sup>,夏效东<sup>1</sup>,唐 标<sup>2*<br /></sup></p> 湘华鲮一种急性细菌性肠炎的病原分离及组织病理研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20190905 为鉴定人工养殖的湘华鲮出现大量由急性肠炎引起死亡的病原,本研究取病鱼腹水和肠道粘液进行病原菌分离纯化,获得菌株XHL-03。经人工感染试验验证,人工感染的湘华鲮出现与自然发病相同的症状,初步确定其为该病致病菌株。经细菌形态学、生理生化特征、16S rDNA序列分析及系统发育树聚类和血清凝集试验检测,结果显示致病菌株XHL-03为非O1/非O139型霍乱弧菌,其对诺氟沙星、头孢曲松、新霉素等10种药物高度敏感。病理切片显示,感染病原的湘华鲮肝胰脏细胞出现坏死,有急性胰腺炎和肠炎综合症状。本研究为湘华鲮霍乱弧菌引起的急性肠炎的临床诊断和防控提供参考依据。<br />   2019年10月25 00:00 2019年09 906 910 0 &nbsp; <p>蒋国民<sup>1<b>†</b></sup>,邓时铭<sup>1<b>†</b></sup>,邹 利<sup>1</sup>,程小飞<sup>1</sup>,李传武<sup>2,3*</sup>,刘 丽<sup>1*<br /></sup></p> H5和H7亚型高致病性禽流感病毒新型冻干微芯片双重荧光定量RT-PCR方法的建立和初步应用 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20190906 为建立鉴别检测H5和H7亚型高致病性禽流感病毒(HPAIV)双重荧光定量RT-PCR检测方法,本研究根据已登录的H5和H7亚型HPAIV HA基因裂解位点序列差异分别设计引物和探针,对反应体系各条件优化后首次建立了同时鉴别检测H5与H7亚型HPAIV的新型冻干微芯片双重荧光定量RT-PCR方法。特异性试验结果显示,该方法除对H5和H7亚型HPAIV检测结果为阳性外,对其它几种常见的禽病病原检测结果均为阴性,该方法特异性强;敏感性试验结果显示,该方法检测下限为病毒浓度1×101 TCID50/mL,而常规荧光定量RT-PCR检测下限为1×102 TCID50/mL,敏感性高;标准曲线分析后结果显示,本研究所建立方法的扩增效率比常规荧光定量RT-PCR高,二者相关系数均为0.997;批内和批间重复性试验结果显示,Ct值的变异系数均小于2 %以下,重复性高。临床样品检测结果显示,该方法所需样本微量仅为1 μL~2 μL;操作简便、快速,检测过程&lt;40 min,可用于现场检测;而且利用该方法与常规荧光定量PCR方法以及测序对临床样品进行检测,三者结果完全吻合。本研究所建立的新型冻干微芯片双重荧光定量RT-PCR检测方法为H5和H7亚型HPAIV监测和临床检测提供了可行的技术手段。<br />   2019年10月25 00:00 2019年09 911 916 0 &nbsp; <p>高晓艺<sup>1,2</sup>,韩 焘<sup>1</sup>,王乃迪<sup>1</sup>,王传彬<sup>1</sup>,杨 林<sup>1</sup>,王新杰<sup>3</sup>,高姗姗<sup>3</sup>,孙晓明<sup>3</sup>,<br />胡祥钰<sup>3</sup>,石玉祥<sup>2*</sup>,刘玉良<sup>1*<br /></sup></p> 猪流行性腹泻病毒IgA抗体间接ELISA方法的建立 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20190907 为建立检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)血清特异性IgA抗体的间接ELISA方法,本研究利用融合PCR的方法,将PEDV G2型LNct2a株S蛋白的S1基因片段与人源IgG分子的Fc基因片段融合,克隆于真核表达质粒pAAV-IRES-hrGFP中,构建真核表达质粒pAAV-LNCT2-S1-Fc并转染293T细胞,表达并纯化了S1蛋白。以纯化的S1蛋白作为包被抗原,以羊抗猪IgA-HRP为二抗,通过优化反应条件,建立了检测PEDV G2型特异性IgA抗体的间接ELISA方法,并对该方法进行了特异性、敏感性及重复性试验。特异性试验结果显示该方法对猪传染性胃肠炎病毒、轮状病毒、猪德尔塔冠状病毒和圆环病毒的阳性血清均无交叉反应;敏感性试验结果显示该方法能够检测出400倍稀释的阳性血清;批内和批间重复性变异系数均小于10 %。利用该间接ELISA方法和间接免疫荧光方法(IFA)同时对临床样品检测,结果显示二者总符合率为98.6 %。本研究建立的ELISA方法特异性强、敏感性高、重复性好,能够用于检测及评价血清中PEDV特异性IgA抗体的水平,为PEDV流行情况及免疫效果评价提供了有效的手段。<br />   2019年10月25 00:00 2019年09 918 923 0 &nbsp; <p>刘 烨,张家林,王潇博,石 达,时洪艳,陈建飞,张 鑫,冯 力*<br /></p> 猪流行性腹泻病毒单克隆抗体的制备及胶体金免疫层析检测方法的建立 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20190908 为了建立快速检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的胶体金免疫层析方法(GICA),本研究用PEDV免疫BALB/c小鼠,制备杂交瘤细胞。分别采用间接ELISA和表面荧光吸附法(CSFIA)筛选,共得到33株能够稳定分泌抗PEDV单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株。通过制备小鼠腹水并纯化后测得其中21株细胞分泌的MAb的ELISA效价在1∶1.6×104以上,且均仅与PEDV反应,不与TGEV和PRV反应,特异性较强。采用双抗体夹心ELISA法筛选出能够配对检测PEDV的MAb有5株,以其中的4H7为检测抗体、5A9为俘获抗体初步建立了检测PEDV的GICA。该GICA特异性试验结果显示,除了PEDV检测结果为阳性外,该方法对伪狂犬病病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和传染性胃肠炎病毒的检测结果均为阴性,特异性较强;该方法针对PEDV的最低检测限为7.8×103 TCID50/mL,敏感性较高;批内和批间重复性检测样品结果无明显差异,具有较好的重复性;将该方法和RT-PCR方法同时检测115份临床样品,该方法与RT-PCR阳性符合率为93 %。本实验制备的PEDV MAb,以及基于该AMbs初步建立的检测PEDV的GICA为开发快速检测PEDV的胶体金免疫层析试纸条奠定了基础。<br />   2019年10月25 00:00 2019年09 924 928 0 &nbsp; <p>贾宇旻<sup>1,2</sup>,徐 飞<sup>3</sup>,边洪芬<sup>3</sup>,王 娟2,贾爱卿2,唐 勇3,贾杏林1*<br /></p> 鳜弹状病毒TaqMan荧光定量 PCR检测方法的建立及应用 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20190909* 为建立快速、准确检测鳜弹状病毒(SCRV)的TaqMan荧光定量PCR方法,本实验根据弹状病毒N基因中的保守序列,设计合成了一对特异性引物和TaqMan探针,以构建的标准质粒为模板,经条件优化后建立了SCRV的TaqMan荧光定量PCR检测方法,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行试验。结果显示,建立的TaqMan荧光定量 PCR检测方法标准曲线的相关系数为0.999,质粒标准品在1×108拷贝/μL~1×101拷贝/μL范围内有较好的线性关系;该方法可以特异性检测SCRV,但对草鱼出血病病毒(GCRV)、锦鲤疱疹病毒(KHV)、罗非鱼湖病毒(TiLV)、石斑鱼虹彩病毒(SGIV)、传染性脾肾坏死病(ISKNV)、神经坏死病毒(NNV)及鲤春病毒血症病毒(SVCV)等7种常见鱼类病毒检测结果均为阴性;最低可检测到的质粒标准品浓度为102拷贝/μL,比常规PCR方法灵敏100倍;该方法组内与组间变异系数均小于2 %。采用该方法对35份临床样品进行检测,结果显示阳性检出率为31 %,而普通PCR阳性检出率为14 %,该方法检出率比常规PCR高。本研究建立的SCRV的TaqMan荧光定量 PCR检测方法为SCRV的快速检测提供了可行的技术手段。<br />   2019年10月25 00:00 2019年09 929 934 0 &nbsp; <p>梁红茹<sup>1</sup>,蔡秀珠<sup>2</sup>,范芷仪<sup>2</sup>,林 强<sup>1</sup>,付小哲<sup>1</sup>,刘礼辉<sup>1</sup>,黄志斌<sup>1</sup>,牛银杰<sup>1</sup>,<br />林 蠡<sup>2</sup>,李宁求<sup>1*<br /></sup></p> H7N9禽流感DNA疫苗的免疫保护效力研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20190910 为检测H7N9禽流感病毒(AIV) DNA疫苗的免疫保护效力,本研究将H7N9禽流感疫苗株A/Chicken/Guangxi/SD098/2017(H7N9) [CK/GX/SD098/17(H7N9)]的HA基因密码子优化后,定向克隆至载体pCAGGS中构建重组质粒pCA-SD098。将pCA-SD098转染至293T细胞后,采用间接免疫荧光(IFA)和western blot检测,结果显示,HA蛋白可以在293T细胞中正确表达。分别利用15 μg和20 μg重组质粒pCA-SD098免疫3周龄SPF鸡,3周后以相同的剂量和方式加强免疫,加强免疫一周后通过鼻腔分别感染105 EID50的同源高致病性AIV(HPAIV)CK/GX/SD098/17 (H7N9)和异源低致病性AIV(LPAIV) A/Chicken/Chongqing/SD057/2017(H7N9)[CK/CQ/SD057/17 (H7N9)],攻毒10 d内记录免疫鸡发病和死亡情况,检测免疫鸡HI抗体水平,并于攻毒后第3 d、第5 d和第7 d无菌采集所有鸡的喉头和泄殖腔拭子,采用红细胞凝集试验(HA)检测病毒的滴度。结果显示,重组质粒pCA-SD098免疫后可以诱导SPF鸡产生较高水平的HI抗体,15 μg pCA-SD098剂量免疫鸡后能够完全抵御H7N9 HPAIV 的致死性攻击,20 μg pCA-SD098剂量可以有效阻断H7N9 LPAIV的感染。攻毒后,所有免疫鸡无发病、无死亡、无排毒,本研究为质粒pCA-SD098作为防控H7N9禽流感的候选DNA疫苗提供了实验依据。<br />   2019年10月25 00:00 2019年09 935 939 0 &nbsp; <p>梁真洁<sup>†</sup>,潘俊慧<sup>†</sup>,于晓菲,陈普成,曾显营,柳金雄,施建忠,邓国华,姜永萍<sup>*</sup>,陈化兰<sup>*<br /></sup></p> DENND1B蛋白对AP2B1蛋白细胞中表达及分布影响的研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20190911 &nbsp;摘 要:为探究含DENN结构域蛋白1B (DENND1B)对网格蛋白依赖性内吞接头蛋白复合体(AP-2)的β亚基(AP2B1)的影响,本实验利用siRNA干扰技术以及慢病毒包装过表达系统改变DENND1B蛋白的表达水平,通过荧光定量PCR(qPCR)、western blot以及激光共聚焦技术研究DENND1B蛋白对AP2B1蛋白的表达以及细胞内定位的影响。结果显示:DENND1B蛋白沉默后能够下调AP2B1蛋白的表达,而过表达DENND1B后能够上调AP2B1蛋白的表达,并且干扰DENND1B蛋白表达后能够显著性地改变AP2B1在细胞内的定位(p&lt;0.05),使AP2B1蛋白由核周聚集改变为胞质弥散分布。上述结果表明DENND1B蛋白能够调控AP2B1蛋白的表达以及细胞定位。本实验为研究接头蛋白以及网格蛋白依赖性的质膜内吞途径提供了新的切入点。<br />   2019年10月25 00:00 2019年09 940 944 0 &nbsp; <p>李奇兵,赵玉辉,王广文,温 霞,梁立滨,李俊平,黄山雨,孙 楠,姜 丽,陈化兰,李呈军<sup>*<br /></sup></p> 重组优势T、B细胞表位的猪圆环病毒2型Cap蛋白的原核表达及免疫原性研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20190912 探究猪圆环病毒2型(PCV2)优势T、B细胞表位对Cap蛋白免疫原性的影响,本研究将前期研究筛选到的PCV2 Rep和Cap蛋白中的T、B细胞表位,分别构建pET-rB-Cap、pET-rT-Cap和pET-rT-B-Cap重组质粒,并转化到大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导表达后,采用SDS-PAGE和western blot检测3种重组蛋白:rB-Cap、rT-Cap和rT-B-Cap。结果显示,上述3种重组蛋白均高效表达且具有良好的反应原性。将70只4周龄~6周龄的BALB/c雌鼠随机分为7组,分别免疫不同的重组蛋白或者全病毒灭活疫苗,并对其产生的免疫原性进行检测。结果显示,各实验组小鼠的血清抗体水平均显著高于PBS组(p&lt;0.01),其中rT-B-Cap组小鼠抗体水平显著高于PCV2全病毒灭活疫苗组和rCap组(p&lt;0.01)。综上所述,PCV2 Cap蛋白同时串联T、B优势抗原表位时的免疫原性显著提高。本研究为PCV2多表位疫苗及基于Cap蛋白的亚单位疫苗的研究提供了新的途径。<br />   2019年10月25 00:00 2019年09 945 950 0 &nbsp; <p>聂恺阳,吴云燕,易 琳,吴祖雄,陈金顶,赵明秋*<br /></p> 新RGD嵌合体肽对黑色素瘤细胞B16增殖及其黑色素合成的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20190913 为研究新合成的靶向抗肿瘤肽RGD-T-La(S)、RGD-T-La(FS)对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖及其黑色素合成的影响,本研究将T-La (S)、T-La (FS)与RGD (精氨酸-谷氨酸-天冬氨酸)小分子蛋白质偶联,合成新的靶向抗肿瘤肽RGD-T-La (S)、RGD-T-La (FS)。通过CCK8法检测多肽对B16细胞增殖的影响;微量酶标法检测多肽作用于B16细胞后乳酸脱氢酶(LDH)含量变化;透射电镜观察多肽作用B16细胞后的超微结构;流式细胞仪检测多肽对B16细胞周期的影响;NaOH裂解法和L-Dopa氧化法分析多肽对黑色素合成含量和酪氨酸酶活性的影响;荧光定量PCR (q-PCR)法分析多肽对黑色素合成关键因子酪氨酸酶(TYR)和小眼相关转录因子(MITF)基因转录水平的影响。结果显示,RGD-T-La(S)、RGD-T-La (FS)在10 μg/mL时能够显著抑制B16细胞的增殖,且呈现时间浓度依赖性;RGD嵌合体肽在20 μg/mL时能够显著增加B16细胞中LDH含量,且呈现浓度依赖性;透射电镜结果显示RGD嵌合体肽作用B16后,细胞出现自噬体及线粒体自噬现象;同时RGD嵌合体肽对酪氨酸酶活性和细胞黑色素蛋白的生成具有明显的抑制作用,显著降低TYR和MITF基因的转录水平。上述结果表明,RGD嵌合体肽在体外具有诱导细胞凋亡,抑制B16细胞增殖的作用,能够促进抗肿瘤肽T-La (FS)对肿瘤细胞的靶向杀伤作用。本实验为研究RGD嵌合体肽RGD-T-La (S)和RGD-T-La (FS)靶向抗肿瘤的作用机制以及为临床相关抗肿瘤药物的研发提供科学依据。<br />   2019年10月25 00:00 2019年09 951 957 0 &nbsp; <p>姜 轩,付 超,赵瑞利*,金天明,马吉飞,孙英峰,于晓雪,<br />张 欣,刘梦月,潘晨浩<br /></p> 2016年~2018年山东地区25株H9N2亚型禽流感病毒分子分析 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20190914 H9N2亚型禽流感(AI)持续在我国鸡群中广泛流行,为了明确山东及周边养殖场H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的分子进化情况,本研究对2016年~2018年间从山东及周边养殖场病鸡中分离鉴定得到的25株H9N2亚型AIV分别纯化后进行全基因组测序和遗传演化分析,并分析序列中重要氨基酸位点的变异情况。全基因组序列分析显示:25株H9N2 AIV 8个基因节段均属于欧亚谱系,但8个基因节段的分子进化关系呈现出基因多样性:HA、NA基因来自Y280-like,25株分离株HA基因之间的同源性为92.8 %~99.9 %,NA基因之间的同源性为91.0 %~99.9 %;PB2基因来自G9-like;PB1、PA、NP、NS基因来自F98-like;M基因来自G1-like。HA蛋白的受体结合位点149、198、234和235位点变异最多,25株分离株HA均出现Q234L突变(相当于H3第226位氨基酸);21株分离株在HA蛋白218~300位糖基化位点缺失,所有分离株均在313~315位出现潜在的糖基化位点;仅3株分离株的NA蛋白在402位出现糖基化位点,而NA蛋白在264位有11株分离株出现了潜在糖基化位点;5株分离株在PB2蛋白的627位点发生变异,1株在PB2蛋白的714位点发生变异。以上结果表明,近3年山东周边地区流行的H9N2 AIV是由不同进化方式而来,部分重要氨基酸位点出现了变异,具有潜在感染哺乳动物的可能性,因此需加强H9N2 AIV的分离鉴定,密切监测其遗传变异情况。<br />  2019年10月25 00:00 2019年09 958 963 0 &nbsp; <p>陈照坤<sup>1,2</sup>,鲁 梅<sup>3</sup>,黄小莹<sup>2</sup>,马鑫鑫<sup>2</sup>,朱凤珠<sup>4</sup>,黄庆华<sup>2</sup>,古曙光<sup>5</sup>,杨少华<sup>2</sup>,许传田<sup>2*</sup>,<br />崔 宁<sup>2*<br /></sup></p> 福建省14株PRRSV-2全基因组特性分析 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20190915 为了解福建省PRRSV的流行情况及分子特征,本研究选取14株不同年份不同谱系的PRRSV-2 (lineage 3、lineage 8.7、lineage 5.1和lineage 1)进行全基因组扩增并测序分析。结果显示,福建省14株PRRSV-2基因组全长为15 016 bp~15 407 bp,与VR-2332、CH-1a、JXA1和NADC30的核苷酸序列同源性为82.9 %~99.4 %,14株PRRSV-2之间核苷酸序列同源性为82.1 %~99.3 %,差异较大。分离株FJCH、FJZH与JXA1-R疫苗株高度同源(99.5 %~99.6 %),且处于同一进化分支,推测其可能来源于疫苗株。重组分析显示14株PRRSV-2存在较高的重组概率(3/14),均发生在lineage 8.7和lineage 1之间。本研究为科学防控福建地区PRRS提供了参考数据。<br />   2019年10月25 00:00 2019年09 964 968 0 &nbsp; <p>魏春华,夏 伟,马 英,李 娜,吴熠丹,勾明郗,林志峰,戴爱玲,杨小燕*,刘建奎*<br /></p> 锡兰钩虫TIMP基因的序列分析与原核表达 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20190916 为表达锡兰钩虫金属蛋白酶组织抑制剂(Ace-TIMP)重组蛋白,本实验根据GenBank中锡兰钩虫TIMP (ANCCEY-04405)基因序列设计引物扩增犬源锡兰钩虫Ace-TIMP基因,利用生物信息学软件对其序列鉴定;根据编码的氨基酸序列进行遗传进化关系分析;构建其重组表达质粒pET-32a-Ace-TIMP-MP,转化大肠杆菌,并经诱导表达。结果显示,Ace-TIMP基因ORF为648 bp,编码215个氨基酸,包含16个氨基酸的信号肽,具有TIMP家族Cys-X-Cys特征性序列。进化树分析显示Ace-TIMP与犬钩虫TMP-2位于同一分支。经诱导表达与纯化,获得了分子质量约为42 ku的可溶性融合蛋白。本实验克隆了Ace-TIMP基因并利用原核表达系统表达了可溶性的重组蛋白,为Ace-TIMP生物学活性的研究和免疫潜能的评价奠定了基础。<br />   2019年10月25 00:00 2019年09 969 972 0 &nbsp; <p>颜欣欣,杭建雄,刘云秋,黄 岳,冉荣坤,赵 琪,何 龙,李 秀,刘菊玫,李国清*<br /></p> 水貂阿留申病毒感染过程中主要分子蛋白作用机理研究进展 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20190917 2019年10月25 00:00 2019年09 973 976 0 &nbsp; <p>栾美慧<sup>1</sup>,李健明<sup>1</sup>,时 坤<sup>1</sup>,刘 艺<sup>2</sup>,徐 宁<sup>2</sup>,郜艳雪<sup>1</sup>,宫庆龙<sup>2</sup>,<br />孙志博<sup>2</sup>,冷 雪<sup>1*</sup>,杜 锐<sup>3*<br /></sup></p> 应用减毒沙门菌载体递呈多糖抗原的研究进展 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20190918 2019年10月25 00:00 2019年09 977 981 0 &nbsp; <p>卞晓萍<sup>1</sup>,刘 青<sup>2</sup>,孔庆科<sup>*<br /></sup></p> E3泛素连接酶RNF114:一种新的抗猪瘟病毒宿主因子 /oa/darticle.aspx?type=view&id=研究进展评述20190101 在病毒与宿主进化的过程中,E3泛素连接酶作为宿主和病毒联系的桥梁,介导这二者之间的相互作用。在宿主细胞中,E3泛素连接酶通过调节宿主细胞的抗病毒免疫应答间接地抑制病毒复制,如调控信号通路、细胞凋亡和细胞分化等。此外,E3泛素连接酶也可以直接靶向并降解病毒编码蛋白调控病毒复制。为逃逸宿主的抗病毒反应,许多病毒编码或劫持E3泛素连接酶,修饰宿主蛋白以利于其复制,如:kK3和kK5通过调控宿主细胞膜中的MHC-I、MHC-II以及细胞膜表面的免疫受体ICAM-1和DC-SIGN等分子,抑制细胞的免疫应答,帮助病毒逃逸宿主的免疫应答。<br />  RNF114包含5个保守的结构域:RING结构、C2HC结构、2个C2H2锌指结构和UIM结构,RING区域赋予RNF114E3泛素连接酶活性。目前,有报道称,人源RNF114参与调控RIG-I/MDA5信号通路、T细胞激活、细胞周期、细胞分化和衰老等,鲜有文献报道RNF114与病毒的相互作用关系。中国农业科学院哈尔滨兽医研究所仇华吉研究员团队前期研究发现,猪源RNF114 (pRNF114)为潜在的抗猪瘟病毒(CSFV)宿主分子,但其背后的分子机制未知。<br />  近期仇华吉研究团队在《Journal of Virology》上发表了题为“Porcine RING finger protein 114 inhibits classical swine fever virus replication via the K27-linked polyubiquitination of viral NS4B”的研究论文,该研究首次报道了pRNF114直接参与病毒调控,并进一步解析其调控CSFV复制的分子机制。<br />  该研究首先检测了CSFV感染过程中pRNF114的表达情况,结果显示在CSFV-SM (野毒株)感染猪的外周血单个核细胞(体内)以及CSFV感染的PK-15、肺泡巨噬细胞和外周血单个核细胞(体外)中,pRNF114的mRNA转录水平随着CSFV感染时间、感染剂量的增加而上调,表明pRNF114参与调控CSFV的复制。在pRNF114抗病毒功能方面:该研究将不同剂量(MOI=0.01和0.1)的rCSFV-Fluc(报告病毒株)或CSFV-SM感染过表达pRNF114的PK-15细胞系,在病毒感染24 h和48 h后,从荧光素酶活性、病毒滴度和基因组拷贝数3个方面评价CSFV的复制水平,结果显示,过表达pRNF114抑制CSFV的复制;相反,将CSFV感染敲除RNF114的PK-15细胞系,在病毒感染后24 h和48 h检测CSFV复制水平,结果表明,敲除内源性RNF114则促进CSFV复制。过表达及敲除试验均证实,pRNF114是一种抗CSFV复制的宿主分子。在pRNF114抗CSFV分子机制方面:该研究构建了pRNF114 (C64/67A)突变体,并经体外泛素化试验证实,pRNF114 (C64/67A)丧失了E3泛素连接酶活性;将CSFV感染过表达pRNF114 (C64/67A)的PK-15细胞系,结果证实,pRNF114 (C64/67A)不能抑制CSFV复制,表明pRNF114抑制CSFV复制依赖其E3泛素连接酶活性;其次,通过免疫共沉淀试验筛选到pRNF114与CSFV NS4B蛋白存在直接的相互作用,且证实pRNF114催化NS4B蛋白发生K27连接的聚泛素化修饰,进而通过蛋白酶体途径降解NS4B蛋白。<br />  前期有文献称,当蛋白发生K27连接的聚泛素化修饰,可以促进该蛋白与其他蛋白的相互作用。该研究发现NS4B蛋白发生K27连接的聚泛素化修饰,促进了其蛋白酶体途径降解,为K27连接的聚泛素化修饰所介导的生物学功能提供新的线索。此外,该研究首次解析了pRNF114抗CSFV复制的分子机制,丰富了E3泛素连接酶直接抗病毒的生物学功能。 2019年10月25 00:00 2019年09 982 982 0 利用深度测序和单个B细胞PCR技术解析猪流行性腹泻病毒免疫后的猪抗体谱 /oa/darticle.aspx?type=view&id=研究进展评述20190902 猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染主要引起10日龄内新生仔猪呕吐、水样腹泻和严重肠炎,导致高致病率和高死亡率,是目前引起我国新生仔猪腹泻的主要病原,每年给我国养猪业造成重大的经济损失。预防PEDV感染主要通过B细胞产生的抗体免疫应答,特别是肠道黏膜局部抗体的免疫应答。大量文献已经证实PEDV感染或免疫接种怀孕母猪通过乳汁能够保护刚出生的哺乳仔猪,明显减轻仔猪的临床症状和死亡率,并发现仔猪的被动免疫保护和初乳、母乳中的中和抗体水平最相关。因此如何诱导高水平的保护性抗体是制定科学的免疫程序和设计下一代新型疫苗必须回答的科学问题。<br />  机体免疫应答的强大就在于其产生抗体的多样性。机体B细胞能够产生高达1013不同特异性的抗体,这些不同特异性抗体形成一个抗体谱。抗体特异性主要由抗体可变区决定。抗体重链可变区由VH、DH和JH 3种不同基因片段重排形成,轻链可变区由VL和J 两个不同基因片段组成。每个基因片段在胚系基因中均存在多个不同的等位基因片段。然而抗体基因的使用并不是完全随机的,存在一些优势基因。抗体谱除了受遗传基因决定外还受所接触的抗原的影响。抗体谱分析正成为评价机体抗体免疫应答的一个重要指标。尽管以前对猪的抗体谱进行过一些研究, 但这些研究主要采用传统的克隆和Sanger测序方法,而且主要研究未感染的胚胎或新生仔猪的天然抗体谱,而对于PEDV这样重要的病毒感染或免疫后的抗体谱的研究未见报道。<br />  近期《Science China Life Sciences》发表了哈尔滨兽医研究所猪消化道传染病创新团队的“Next-generation sequencing and single-cell RT-PCR reveal a distinct variable gene usage of porcine antibody repertoire following PEDV vaccination”的研究性论文。该论文结合抗体谱高通量测序和单个B细胞PCR扩增抗体技术,揭示了PEDV免疫后猪外周血和肠系膜淋巴结组织中抗体基因的多样性和使用频率。研究人员分别从PEDV免疫猪的外周血和肠系膜淋巴结中分离获取淋巴细胞,提取其RNA,采用5’RACE技术制备抗体文库,然后进行高通量测序分析。结果显示,所有13种猪抗体重链功能性可变基因、4种所有的猪抗体K链功能性可变基因以及5种所有的猪抗体L链功能性可变基因均可以在外周血和肠系膜淋巴结中检测到;抗体重链可变基因主要使用IgHV1-4和IgHV1S2,而K链可变基因主要是IgKV1基因家族,仅IgKV1-11基因成员的使用频率就高达67.82 %,L链可变基因主要使用IgLV3-3和IgLV3-4。通过比较发现尽管外周血和肠系膜淋巴结中的抗体基因具有大体一致的多样性和使用频率,但存在局部的差异性,肠系膜淋巴结中抗体基因IgVH1-6和Ig1-12的使用频率要高于外周血。<br />  此外,结合单个B细胞 PCR扩增抗体技术,对PEDV S蛋白特异性抗体基因的使用进行了统计分析。该研究进一步比较了总抗体谱和PEDV S蛋白特异性的抗体谱。结果显示,与整体抗体谱相比较,PEDV S蛋白选择性诱导IgHV1-4、IgHV1-14、IgLV3-3,展示出一个相对独特的PEDV S蛋白的特异性抗体谱。该研究采用抗体高通量测序和单个B细胞PCR扩增抗体技术对猪抗体谱的信息进行了补充和完善,不仅能够加深研究人员对PEDV B细胞免疫应答的认识,而且该研究结果将对有效防控PED和设计PEDV新型疫苗提供重要指导。 2019年10月25 00:00 2019年09 983 983 0 马传染性贫血病毒通过线粒体调控细胞炎症反应和凋亡的机制研究 /oa/darticle.aspx?type=view&id=研究进展评述20190903 马传染性贫血病毒(EIAV)与艾滋病病毒相似,在体内的主要靶细胞是免疫细胞,并且可以在马体内长期潜伏感染,给养马业造成了重大的经济损失。由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所研制的EIAV 弱毒疫苗,是首例经大规模应用证实安全、有效的慢病毒疫苗。阐明该疫苗的作用机理,将为其它慢病毒疫苗的研究提供借鉴。研究表明,EIAV强毒株(EIAVDLV34)感染可造成宿主的“炎症风暴”,并引起致病性损伤,而弱毒疫苗株(EIAVDLV121)感染的宿主细胞可发生高水平的细胞凋亡,进而被清除。该现象与EIAV弱毒疫苗的免疫保护作用机理密切相关,但关于EIAV强弱毒感染引起不同细胞反应的具体机制还未知。<br />  近期发表于《Journal of Virology》的一项研究首次证明了不同毒力EIAV感染细胞后引起线粒体的不同反应从而产生炎症反应或细胞凋亡。该研究利用比较蛋白质组学的方法剖析发生上述反应的具体机制,发现EIAV强弱毒感染靶细胞-巨噬细胞后,总计有447个细胞蛋白发生差异表达,其中包括73个线粒体相关蛋白,是所有细胞器中发生蛋白质差异表达最多的。已知线粒体可以通过改变代谢模式而影响巨噬细胞的极化改变(促炎或抑炎),以及降低膜通透性而引起细胞凋亡。因此,进一步研究了这73个线粒体相关蛋白及其功能。首先,通过生物信息学分析,发现这73个蛋白质的生物学功能主要集中在三羧酸循环、氧化还原、ATP合成、NADH脱氢以及氧化磷酸化等。其次,进一步的功能验证试验显示,在线粒体相关蛋白表达水平发生改变后:1. EIAV弱毒感染细胞的NADH脱氢,氧化磷酸化和ATP生成均受到了抑制,同时,由于低效的氧化磷酸化和抗氧化系统的破坏,导致活性氧的生成过量;2. EIAV弱毒感染细胞的线粒体膜电位下降,通透性增加,线粒体内膜中的细胞凋亡因子释放到细胞质中,激活了“内源性”细胞凋亡;3. EIAV强毒感染细胞以糖酵解代谢模式为主,细胞转化为M1促炎型,分泌促炎因子,引起炎症反应;EIAV弱毒感染细胞以三羧酸循环为主,并且糖酵解被抑制,细胞转化为M2抑炎型,分泌抑炎因子,抑制炎症的发生;4. EIAV强毒感染细胞的线粒体分裂加剧,EIAV弱毒感染细胞的线粒体融合增多。<br />  该研究首次发现了EIAV强毒是通过改变感染细胞的代谢模式,使其转变为促炎型细胞,进而引发炎症反应的,而EIAV弱毒是通过改变感染细胞线粒体的膜通透性,造成高水平的细胞凋亡,进而使其被清除的。该发现为在亚细胞水平揭示EIAV弱毒疫苗的作用机理奠定了基础,并为其它慢病毒疫苗的研发提供了参考。 2019年10月25 00:00 2019年09 984 984 0 宿主调控禽疱疹病毒I型感染机制新发现:锁定宿主细胞脂肪酸代谢 /oa/darticle.aspx?type=view&id=研究进展评述20190904 鸡传染性喉气管炎(Avian Infectious Laryngotracheitis,AILT)是由疱疹病毒科、α型疱疹病毒亚科的传染性喉气管炎病毒(Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV)引起的一种急性、接触性上呼吸道传染病,在世界各国和地区时有发生。该病毒传播速度快,感染率高达95 %~100 %,感染后难以清除。虽然ILTV的致死率依据病毒毒力强弱以及鸡的个体免疫力差异从5 %~70 %不等,但该病毒可以感染所有年龄的蛋、肉、种用家禽,严重降低鸡的生产性能,是危害我国养禽业的主要传染病之一。目前,基于机体细胞免疫应答的ILTV弱毒活疫苗接种是防控AILT的主要方法,在我国及世界AILT防控中发挥着重要作用。然而,同其它α疱疹病毒一样,ILTV可以潜伏在宿主的三叉神经节,疫苗接种无法清除机体内这些潜伏感染的病毒,造成免疫个体终生带毒且不定期向外界排毒。加之ILTV不同病毒株间可以在免疫鸡体内发生基因重组,形成致病力更强的新病毒,因此很多国家和地区的免疫鸡群仍会反复暴发疫情。结合当前我国禽病混合感染频发的现状,这一问题显得尤为突出。<br />  深入研究ILTV与宿主细胞的互作机制,探究基于宿主细胞内源性抗病毒机制的防治策略,有望为完善当前AILT防治体系提供新的切入点。国内外该领域已经取得了一系列进展。目前已知与人类α疱疹病毒类似,ILTV可以抑制病毒感染细胞内的死亡信号通路,延长病毒感染细胞的存活时间,最大程度地保障病毒在细胞内的复制。在这一过程中,宿主非受体酪氨酸激酶Src发挥核心调控作用,是潜在的AILT治疗靶标。然而,科研人员在通过调控宿主Src活性防控AILT的研究中发现,抑制Src活性虽然能有效限制ILTV增殖,但却显著增强了病毒对组织细胞的病理损伤,加剧了感染个体的死亡。这一副作用的机制尚不明确,因此严重制约了靶向Src治疗方法的研发和应用。<br />  近期发表于《Virology》的一项研究对该问题进行了探究。该研究以表达EGFP蛋白的ILTV病毒株体外感染鸡LMH细胞为研究模型,发现宿主细胞Src可以通过不依赖病毒复制、病毒游离扩散、胞外囊泡释放、感染细胞增殖及细胞间胞质直接联系的方式调控ILTV在宿主细胞间的直接扩散,从而影响ILTV感染。该研究进一步发现,抑制Src活性则恢复了ILTV对宿主脂肪酸代谢的促进作用,进而引发ILTV在相邻细胞间的快速扩散,最终导致严重的病理损伤。在自然感染过程中,这一倾向被宿主Src-FAK正反馈协同激活所抑制,从而确保病毒增殖和宿主损伤在感染细胞资源被充分耗尽前处于平衡状态。然而,抑制Src活性打破了这一平衡,进而造成感染细胞严重的病理损伤。该研究指出,在抑制Src活性的同时调控宿主细胞脂肪酸代谢水平可以有效抑制ILTV增殖并显著缓解其副作用。<br />  目前,面对ILTV潜伏感染难以清除和疫苗株毒力返强等诸多问题,全球养禽业迫切需要更为安全有效的AILT防制方法,以完善现有ALIT防控策略。该研究丰富了当前对于宿主Src调控ILTV感染机制的认知,并可能为基于宿主Src靶向治疗方法的建立和当前ALIT防控体系的完善提供新的切入点。 2019年10月25 00:00 2019年09 985 985 0 CD163及MYH9通过直接互做介导 PRRSV细胞侵入 /oa/darticle.aspx?type=view&id=研究进展评述20190905 猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)是单股正链RNA病毒,属动脉炎病毒科(Arteriviridae)猪动脉炎病毒属(Porartevirus)成员。PPRSV具有严格的宿主细胞嗜性,在体内主要感染单核巨噬细胞,包括猪肺泡巨噬细胞(PAMs)。研究表明,在PRRSV进入允许细胞的过程中,大量宿主因子可能参与其中,如硫酸肝素(Heparin sulfate,HS)、CD151、CD163、唾液酸粘附素(Sialoadhesin,CD169)、DC-SIGN (CD209)及非肌肉肌球蛋白重链-9(Non-muscle myosin heavy chain 9,MYH9)等,其中CD163和MYH9被认为是病毒进入细胞所必须的宿主因子。在MYH9缺陷的COS7细胞中,单独引入CD163并不能使PRRSV感染该细胞,而在其与MYH9共表达的情况下则使得该细胞对PRRSV易感,表明两个宿主因子在PRRSV进入允许细胞中具有协同作用。但是,这两种宿主因子是否通过直接互做来发挥其在PRRSV细胞侵入过程中的协同作用,以及在病毒侵入的哪个阶段发挥作用仍然未知。<br />  近期发表于《Frontiers Microbiology》杂志上的研究论文“PRRSV cell internalization mediated by the direct interaction between CD163 and MYH9”对CD163和MYH9在介导PRRSV进入允许细胞的作用机制开展了深入研究。作者首先利用免疫共沉淀试验证实,在感染或未感染PRRSV的PAMs中,CD163和MYH9均存在直接的相互作用;然后对CD163的截短表达及互做试验表明,CD163的氨基端-清道夫受体半胱氨酸富含区1-4 (Scavenger receptor cysteine-rich domains 1 to 4,SRCR1-4)可以同MYH9的羧基端直接作用。然而在PRRSV的非允许细胞HEK293T 中,稳定表达CD163 SRCR1-4并不能介导PRRSV的吸附,表明CD163 SRCR1-4与MYH9的直接互做不参与病毒的吸附过程。<br />  在PRRSV感染宿主细胞的过程中,其糖蛋白GP2a和GP4 通过与CD163的互做而介导病毒感染,而CD163的SRCR5结构域被认为是PRRSV感染所必需的区域。为进一步明确CD163与MYH9互做在PRRSV侵入细胞过程中的作用机制,作者在PRRSV的非允许细胞系HEK293T 中稳定表达了CD163、CD163 SRCR1-4及CD163 SRCR5-CT区域,并进行了PRRSV感染试验,结果显示表达完整CD163的HEK293T细胞可以感染PRRSV,并能支持病毒的完整生命周期;表达CD163 SRCR1-4的HEK293T细胞不能吸附病毒;而表达CD163 SRCR5-CT 的HEK293T细胞可以吸附病毒,但其病毒内化及复制效率相比表达完整CD163的细胞却显著降低。用体外表达纯化的CD163 SRCR1-4蛋白同PAMs共孵育,PRRSV感染试验证实病毒的内化被完全阻止。这些结果表明,CD163的SRCR5-CT结构域可介导PRRSV的吸附,而其SRCR1-4结构域则参与病毒的内化,其具体机制为CD163的SRCR1-4区域通过与MYH9的羧基端直接作用,帮助已经完成吸附的病毒粒子进入胞浆,进而完成病毒的复制及装配。 <br />  该研究在前期工作的基础上,进一步阐明了PRRSV侵入细胞相关的两个重要宿主因子CD163和MYH9在介导该病毒侵入中的作用机制,以及它们之间协同效应产生的分子基础,对PRRSV生命周期的认识、疫苗及抗病毒药物的设计具有重要参考价值。尽管有研究表明MYH9参与除PRRSV之外的多种病毒如单纯疱疹病-1型(Herpes simplex virus-1HSV-1)、血小板减少综合征病毒(Thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV)和EB病毒(Epstein-Barr virus, EBV) 等的侵入过程,但作为一种胞浆分布的骨架蛋白,其如何在病毒吸附的诱导下向细胞膜定向分布,并协助病毒侵入的机制还需进一步探究。 2019年10月25 00:00 2019年09 986 986 0