[1]马国达,王茜,于力,等.Sf9细胞PHB2蛋白的原核表达及其抗血清的制备[J].中国预防兽医学报,2011,(07):562-564.
 MA Guo-da,WANG Qian,YU Li.Prokaryotic expression of Sf-PHB2 and preparation of polyclonal antibody[J].Chinese journal of preventive veterinary medicine,2011,(07):562-564.
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Sf9细胞PHB2蛋白的原核表达及其抗血清的制备
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《中国预防兽医学报》[ISSN:1008-0589/CN:23-1417/S]

卷:
期数:
2011年07期
页码:
562-564
栏目:
研究简报
出版日期:
2011-07-15

文章信息/Info

Title:
Prokaryotic expression of Sf-PHB2 and preparation of polyclonal antibody
作者:
马国达;王茜;于力;
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物传染病研究室;黑龙江八一农垦大学生命科学与技术学院;
Author(s):
MA Guo-da12 WANG Qian1 YU Li1
1. Division of Livestock Infectious Diseases, State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology, Harbin Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Harbin 150001, China; 2. College of Biological Science & Technology, Heilongjia
关键词:
Sf9细胞PHB2蛋白原核表达抗体制备
Keywords:
Sf-PHB2 prokaryotic expression polyclonal antibody preparation
摘要:
为了研究Sf9细胞PHB2蛋白(Sf-PHB2)的功能及其对虾白斑综合症病毒(WSSV)极早期基因ie1的转录调控作用,本研究从昆虫细胞Sf9中扩增sf-phb2基因编码区,克隆至表达载体pET30a中,转化到大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达6His-Sf-PHB2重组蛋白。SDS-PAGE分析表明,表达的重组蛋白以包涵体形式存在。在变性条件下,用镍离子螯合柱(Ni-NTA)纯化Sf-PHB2重组蛋白,免疫BALB/c小鼠制备抗体,并用western blot方法检测抗体的反应性。本研究制备了Sf-PHB2抗体,为进一步研究该蛋白的功能奠定基础。
Abstract:
To prepared polyclonal antibody of the Sf-PHB2 protein, the sf-phb2 coding region from cDNA of Sf9 cells was amplified by PCR, and cloned into pET-30a to construct the prokaryotic expression plasmid pET-sf-phb2. The Sf-PHB2 protein was expressed in E. coli of BL21 as a fusion protein with 6 histidine residues with IPTG induction. Thereafter, the fusion protein was purified by Ni-NTA affinity chromatography under denature condition and the antiserum against Sf-PHB2 was obtained from the mouse immunized with Sf-PHB2. Specificity and reactivity of Sf-PHB2 antibody were examined by western blot. The present study has laid a foundation for functional study of Sf-PHB2

参考文献/References:

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备注/Memo

备注/Memo:
基金:国家自然基金(30670075);;兽医生物技术国家重点实验室基金(SKLVBF201003)
更新日期/Last Update: 2011-09-29